上海那艾實(shí)驗儀器有限公司

全國統一服務(wù)熱線(xiàn)021-5161 9676

列舉一下中國藥典中規定的集菌儀具體操作方法

返回列表 瀏覽:8 日期:2025-06-06

《中國藥典》(現行版本為 2025 年版)中未對集菌儀的具體操作步驟進(jìn)行詳細圖文描述,但在 通則 1101 無(wú)菌檢查法 和 通則 1121 微生物限度檢查法 中,明確規定了集菌儀在 薄膜過(guò)濾法 中的應用原則和技術(shù)要求。以下是基于藥典通則內容提煉的操作規范及關(guān)鍵要點(diǎn): 

一、適用范圍 

集菌儀主要用于藥品、生物制品等的 無(wú)菌檢查(確認樣品是否含活菌)和 微生物限度檢查(測定樣品中微生物數量及控制菌),通過(guò) 薄膜過(guò)濾法 實(shí)現以下操作: 樣品過(guò)濾:截留微生物于濾膜表面,排除樣品抑菌成分或富集低濃度微生物。 沖洗與中和:用沖洗液或中和劑消除樣品干擾,確保后續培養準確性。 接種培養:將濾膜轉移至培養基中,觀(guān)察是否有菌生長(cháng)。 

二、核心操作流程(基于藥典通則) 

1.設備與耗材準備 集菌儀要求: 具備 蠕動(dòng)泵 驅動(dòng)管路,可調節流速(通常 0.1~100mL/min),并能保持恒定壓力。 配套 無(wú)菌集菌培養器(含濾膜,孔徑一般為 0.45μm,用于微生物限度檢查;0.22μm 用于無(wú)菌檢查)。 滅菌要求: 集菌培養器、濾膜、管路等耗材需經(jīng) 濕熱滅菌(121℃,30 分鐘)或 無(wú)菌采購(一次性無(wú)菌產(chǎn)品)。 操作需在 無(wú)菌環(huán)境 下進(jìn)行(如潔凈工作臺或無(wú)菌隔離系統)。

2. 樣品過(guò)濾 樣品制備: 按藥典要求制備供試液(如溶解、稀釋樣品),若樣品含防腐劑或抑菌成分,需先 中和(如加入中和劑、滅活酶或采用薄膜沖洗法)。 過(guò)濾操作: 將集菌培養器安裝至集菌儀,連接樣品瓶與蠕動(dòng)泵管路。 啟動(dòng)蠕動(dòng)泵,將供試液通過(guò)濾膜過(guò)濾(流速以不堵塞濾膜為宜,通常 5~20mL/min)。 若樣品黏稠或含顆粒,需先 預過(guò)濾(用相同孔徑濾膜或離心處理),避免濾膜堵塞。 

3. 濾膜沖洗與中和(關(guān)鍵步驟) 沖洗目的:去除樣品殘留的抑菌成分,同時(shí)避免微生物被過(guò)度沖洗損失。 沖洗液選擇: 常用 pH7.0 氯化鈉 - 蛋白胨緩沖液、無(wú)菌水 或 含 0.1% 聚山梨酯 80 的緩沖液(針對油脂類(lèi)樣品)。 若樣品含抗生素,需加入 中和劑(如青霉素酶中和青霉素類(lèi)藥物)。 沖洗量: 無(wú)菌檢查:每膜沖洗量 ≤1000mL(藥典通則 1101),分次沖洗,每次不宜超過(guò) 200mL。 微生物限度檢查:每膜沖洗量 100~200mL(藥典通則 1121),可分 2~3 次完成。 

4. 接種與培養 無(wú)菌檢查: 過(guò)濾完畢后,用無(wú)菌剪刀剪下濾膜(若為封閉式集菌器,可直接開(kāi)啟培養端口)。 將濾膜 等分剪開(kāi),分別轉移至 硫乙醇酸鹽流體培養基(培養需氧菌 / 厭氧菌)和 胰酪大豆胨培養基(培養真菌)中。 培養基用量需覆蓋濾膜,培養溫度與時(shí)間按藥典規定(如需氧菌 30~35℃培養 14 天,真菌 20~25℃培養 14 天)。 微生物限度檢查: 過(guò)濾后,直接將濾膜貼于 營(yíng)養瓊脂培養基(菌落總數)、玫瑰紅鈉培養基(霉菌酵母)或特定選擇性培養基(控制菌)表面。 倒置培養,溫度與時(shí)間按標準執行(如菌落總數 36±1℃培養 48 小時(shí))。 

5. 結果觀(guān)察與判斷 無(wú)菌檢查: 若培養基澄清,或雖渾濁但經(jīng)確證無(wú)菌生長(cháng),判為 符合規定;若渾濁且確證有菌生長(cháng),判為 不符合規定。 微生物限度檢查: 計數濾膜上的菌落數,換算成每單位樣品中的微生物數量,與藥典標準對比(如口服固體制劑菌落總數≤100CFU/g)。 

三、藥典關(guān)鍵技術(shù)要求 

濾膜適用性: 濾膜需通過(guò) 無(wú)菌檢查 和 孔徑驗證(如氣泡點(diǎn)測試),確保無(wú)外源污染且截留能力符合要求。 陰性與陽(yáng)性對照: 每次檢驗需做 陰性對照(取同體積沖洗液過(guò)濾培養,應無(wú)菌生長(cháng))和 陽(yáng)性對照(接種已知菌驗證培養基靈敏度)。 抑菌成分處理: 若樣品有抑菌性,需通過(guò) 中和試驗 確定沖洗量或中和劑用量(藥典通則 1121 附錄 Ⅵ)。 環(huán)境控制: 操作需在 萬(wàn)級背景下的局部百級潔凈區 進(jìn)行(無(wú)菌檢查),或 不低于 D 級潔凈環(huán)境(微生物限度檢查)。 四、注意事項(藥典隱含要求) 防止交叉污染: 每檢一個(gè)樣品需更換管路和濾器,若連續檢測同類(lèi)型樣品,需用 75% 酒精消毒管路接口 后再更換。 設備清潔驗證: 清潔后需進(jìn)行 微生物殘留驗證(如擦拭法檢測設備表面菌落數),確保無(wú) previous sample carryover。 記錄要求: 需記錄過(guò)濾體積、沖洗量、培養條件、菌落數等原始數據,符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規范》(GMP)追溯要求。 

五、藥典原文引用索引 

無(wú)菌檢查法: 《中國藥典》2025 年版 通則 1101《無(wú)菌檢查法》 通則 1121《非無(wú)菌產(chǎn)品微生物限度檢查:微生物計數法》 薄膜過(guò)濾法操作細節: 附錄 ⅩⅢ C《藥品微生物實(shí)驗室質(zhì)量管理指導原則》中 “薄膜過(guò)濾法” 章節。 如需更詳細操作,建議結合那艾儀器集菌儀提供的 驗證方案(需通過(guò)藥典適用性測試)和實(shí)驗室 SOP,確保操作符合法規要求。

集菌儀使用常見(jiàn)問(wèn)題匯總噴霧干燥機制備釔化合物的案例分享

上海那艾實(shí)驗儀器有限公司 版權所有轉載請注明出處

全國服務(wù)熱線(xiàn)

021-5161 9676
色综合久久久久综合体桃_国产AV一区二区三区幸福宝_日韩国产码高清综合一区_天天看片天天av免费观看